T4 DNA Ligase, HC
貨號/規格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化(hua)雙鏈 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸(suan)(suan)和(he) 3'-羥基(ji)末端(duan)之間形(xing)成磷酸(suan)(suan)二酯鍵(jian)。該酶可修復雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交(jiao)體中的單鏈缺口，將 DNA 片段與粘性末端(duan)或平(ping)末端(duan)連(lian)接結合，但對單鏈核酸(suan)(suan)無活性。
T4 DNA 連接酶需要 ATP 作為(wei)輔因子。
產品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株(zhu)，含有從噬(shi)菌體 T4 克隆(long)的基(ji)因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附(fu)形式所需的酶量(liang)。在以下(xia)混(hun)合(he)物中測(ce)定酶活性(xing)：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個(ge)?Weiss 單位相當(dang)于(yu)大(da)約 200 個(ge)粘性末端連(lian)接單位（CEU）。1個(ge)CEU是指在特定條件下(xia)（即在16°C下(xia)30分鐘(zhong)內(nei)），將λ（lambda）DNA的HindIII片段連(lian)接達(da)到50%所(suo)需(xu)的酶量。
適用范圍
? 克隆(long)限制性內切酶生成的 DNA 片段(duan)
??克隆 PCR 產物(wu)
? 將雙鏈寡核苷酸連(lian)接子或(huo)接頭與 DNA 相(xiang)連(lian)
? 定點突變
? 擴增(zeng)片段長度多態性 (AFLP)
? 連接酶介導的 RNA 檢測
? 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的缺口修(xiu)復(fu)
? 線性 DNA 的自(zi)環化