T4 DNA Ligase
貨號/規格：E1014-A/200 Weiss U; E1014-B/1,000 Weiss U; E1014-C/5,000 Weiss U
濃度：5 Weiss U/μL
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產品簡介
T4 DNA Ligase催化(hua)雙鏈(lian) DNA 或(huo) RNA 中(zhong)并列的 5'-磷(lin)酸和 3'-羥基(ji)末(mo)端(duan)之間形成(cheng)磷(lin)酸二酯鍵。該酶可修復(fu)雙鏈(lian) DNA、RNA 或(huo) DNA/RNA 雜交體中(zhong)的單(dan)鏈(lian)缺口，將(jiang) DNA 片段與粘(zhan)性末(mo)端(duan)或(huo)平(ping)末(mo)端(duan)連接結合，但對單(dan)鏈(lian)核(he)酸無活性。
T4 DNA 連接酶需(xu)要 ATP 作為輔(fu)因(yin)子。
產品組成
| 組分 | E1014-A | E1014-B | E1014-C |
| T4 DNA Ligase?(5 Weiss U/μL) | 40 μL | 200 μL | 200 μL ×?5 |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 0.5 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 0.3 mL | 1.5 mL | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有(you)從噬(shi)菌體 T4 克隆的基因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉化為可吸附(fu)形式所需的酶量(liang)。在以下混(hun)合物中(zhong)測定酶活(huo)性(xing)：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個(ge)(ge)?Weiss 單(dan)位(wei)相(xiang)當于大(da)約 200 個(ge)(ge)粘性末端連接單(dan)位(wei)（CEU）。1個(ge)(ge)CEU是指在特定條件下（即在16°C下30分鐘內），將λ（lambda）DNA的HindIII片(pian)段連接達(da)到50%所需的酶量。
適用范圍
? 克(ke)隆限制性內切酶生(sheng)成的 DNA 片(pian)段
??克隆 PCR 產物
? 將(jiang)雙(shuang)鏈寡核苷酸連(lian)接子或(huo)接頭與 DNA 相連(lian)
? 定點突變
? 擴增片(pian)段長度多(duo)態性 (AFLP)
? 連接酶介(jie)導的 RNA 檢測
? 雙螺(luo)旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的缺口修復
? 線性 DNA 的自(zi)環化