Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
使用說明書
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【產品名稱】
Fast DNA Library Plus Prep Kit?for MGI
【貨號/規格】
KM004-A（24?rxns）；KM004-B（96?rxns）；試用裝（6?rxns）
【產品簡述】
本試劑盒(he)針(zhen)對 MGI?高通量(liang)測(ce)序平臺，提供了一管(guan)式便捷、通用的 DNA 文庫構(gou)建方案(an)，將(jiang)片段(duan)化(hua)、末(mo)端補平和(he)末(mo)端加 A 結合(he)到一個步(bu)驟，大(da)大(da)縮短了建庫的時(shi)間、減少了繁瑣步(bu)驟造成的誤差，片段(duan)化(hua)和(he)末(mo)端修復后的產物可(ke)直接(jie)進行接(jie)頭連接(jie)，不(bu)需額(e)外純化(hua)，后續操作和(he)#KM001 Fast DNA Library Prep Kit?for MGI操作相同。完整的文庫定量(liang)可(ke)將(jiang)文庫稀釋至合(he)適濃(nong)度，用雙鏈 DNA 熒光染料(liao)方法（如Thermo Qubit Flex Fluorometer）或(huo) qPCR 絕(jue)對定量(liang)方法。
【樣本類型】
表 1 常用DNA推薦投入量
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應用 |
樣本類型 |
推薦投入量 |
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全基因組測序 |
高質量復雜基因組 |
50ng-1μg |
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全外顯子靶向捕獲測序(xu) |
高質量復雜基因組 |
10ng-1μg |
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全(quan)基因組(zu)靶向捕獲測序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
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全基因組測序 |
微生物基因組 |
1ng-1μg |
推薦使(shi)用 TE 或超純水溶(rong)解 DNA 樣品(pin)，如樣品(pin)中含有 EDTA，則需磁(ci)珠(zhu)純化或加入一定體積的 Neutralization Buffer 中和。
【儲存條件及有效期】
所(suo)有(you)試劑均應(ying)保存(cun)于-20℃，Ligation Buffer 在低溫下會有(you)晶體析出，屬正常現象， 應(ying)平衡至室溫后使(shi)用，產品有(you)效(xiao)期為 12 個(ge)月(yue)。
【組成成分】
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組分 |
24 rxns |
96 rxns |
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FEP Buffer |
120?μl |
480?μl |
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FEP Enzyme Mix |
240?μl |
2×480?μl |
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Fast DNA Ligase |
120?μl |
2×240?μl |
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Fast Ligation Buffer |
600?μl |
4×600?μl |
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2× HIFI Library PCR Master Mix |
600?μl |
4×600?μl |
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Primer Mix?for MGI * |
120?μl |
480?μl |
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Neutralization Buffer |
120?μl |
480?μl |
*FEP Buffer 為片段化(hua)、末(mo)端(duan)修復的(de)反應 buffer，FEP Enzyme Mix 為片段化(hua)、末(mo)端(duan)修復相關(guan)酶混合物。
*若有多個樣(yang)本，則推(tui)薦使(shi)用#KM002 和#KM003 接頭引(yin)物(wu)(wu)組合，本試(shi)劑盒提(ti)供一套引(yin)物(wu)(wu)，引(yin)物(wu)(wu)序(xu)列如下：
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
備注：分(fen)選磁珠推薦使用#NC1011 GDSPure?DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。