RNase A

BR級(ji)，僅供研究使用

貨號：N9047

規格：1g

比活性：≥3000U/mg蛋(dan)白(bai)（≥60Kunitz單位/mg蛋(dan)白(bai)）。

形(xing)式(shi)：含有1 g RNase A，凍干(gan)粉末(mo)

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產品說明

RNase A是一(yi)種內切(qie)核(he)(he)糖(tang)核(he)(he)酸酶，分(fen)子量為13.7 kDa（單體），可在C和U殘基位置(zhi)特異性降解(jie)單鏈RNA。該酶可以(yi)切(qie)割核(he)(he)苷酸5’-核(he)(he)糖(tang)與(yu)鄰近嘧啶(ding)核(he)(he)苷3’-核(he)(he)糖(tang)上磷(lin)酸基團之間的(de)磷(lin)酸二酯鍵，產生(sheng)的(de)2’, 3’-環磷(lin)酸可以(yi)水解(jie)成相應的(de)3’-核(he)(he)苷磷(lin)酸鹽。

RNase A推薦工(gong)作濃度(du)1-100?μg/ml，因應用類型的不同而異。該酶(mei)在多種反應條(tiao)件下均(jun)有(you)活性(xing)。低鹽離子(zi)濃度(du)時（0-100 mM NaCl），RNase A可以切(qie)割(ge)單(dan)鏈RNA、雙(shuang)鏈RNA、以及RNA/DNA雜合子(zi)中的RNA；然而，當NaCl濃度(du)大(da)于300 mM時，RNase A則特(te)異性(xing)切(qie)割(ge)單(dan)鏈RNA。

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應用

——質粒和(he)基因組(zu)DNA的(de)制備(bei)

——從重(zhong)組蛋白制劑中去除RNA

——核(he)糖核(he)酸酶保護試驗

——定位DNA或(huo)RNA中的單堿基突(tu)變

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保存條件

4℃保存。在密封和干燥(zao)條件(jian)下儲存的保質期為三年。RNase A粉末可在室溫下運輸。

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質量控制

功能(neng)檢測方法為質粒(li)DNA提(ti)取(qu)過程中的RNA降解(jie)。

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活性單位的定義

當酵母RNA在37°C和pH 5.0下被(bei)水解時，一個(ge)單位的(de)酶(mei)在260 nm處(chu)導致吸光度增(zeng)加(jia)1.0。

50U大約(yue)相當于1個Kunitz單(dan)位。

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抑制和失活
-抑制劑：最有效的抑制劑是來自哺乳動物細胞細胞質中的~50 kDa蛋白，如核boLock?RNase抑制劑。
-其他抑制劑：尿苷2’,3’-環釩(fan)酸(suan)鹽(yan)(yan)、5’-二磷(lin)酸(suan)腺苷3’-磷(lin)酸(suan)鹽(yan)(yan)和(he)(he)5’-二磷(lin)酸(suan)腺苷2’-磷(lin)酸(suan)鹽(yan)(yan)(2)、SDS、焦碳酸(suan)二乙酯(zhi)、4M胸氰酸(suan)胍加0.1M?2-巰(qiu)基乙醇和(he)(he)重金屬離子。

-用苯酚(fen)/氯(lv)仿萃取(qu)法滅活。

-在95°C下加熱10分鐘后滅活。

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本品僅供科(ke)學研究使用。

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